? 關(guān)于伏馬毒素 ?
伏馬毒素 (Fumonisin FB) 是一種霉菌毒素,是由串珠鐮刀菌產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物。主要污染糧食及其制品,并對某些家畜產(chǎn)生急性毒性及潛在的致癌性,已成為繼黃曲霉毒素之后的又一研究熱點(diǎn)。目前我國現行標準《食品安全國家標準食品中真菌毒素XIAN量》(GB2761-2017)尚未涉及伏馬毒素的XIAN量,不過(guò)在《飼料衛生標準》(GB 13078—2017)規定了部分飼料原料和飼料產(chǎn)品中的FB1和FB2總量的XIAN量標準。其中飼料原料玉米及其加工產(chǎn)品、玉米酒糟類(lèi)產(chǎn)品、玉米青貯飼料和玉米秸稈中伏馬毒素的XIAN量為 60 mg/kg,其他飼料產(chǎn)品中伏馬毒素的XIAN量在5~50 mg/kg。
? 關(guān)于檢測方法?
GB 5009.240-2023 食品安全國家標準 食品中伏馬菌素的測定 (將于2024年3月實(shí)施)
LS/T 6130-2017 糧油檢驗 糧食中伏馬毒素B1、B2的測定 超高效液相色譜法
本方案采用IAC-107伏馬毒素免疫親和柱
IAC-107伏馬毒素免疫親和柱能夠特異性的純化與濃縮樣品中的伏馬毒素B1 、B2 、B3 . 伏馬毒素免疫親和柱廣泛地應用于糧食、食品、飼料、等樣品的提取,該方法速度快、操作簡(jiǎn)單、準確性高,對準確靈敏的測定樣品中的伏馬毒素起到十分重要的作用。
? 操作流程?
一、樣品前處理
1.樣品提取及稀釋
1.2 移取2.0mI濾液加入48mL0.1%的吐溫/PBS稀釋混勻。
2.1將免疫親和柱連接于玻璃注射器下準確移取50.0mL上述樣品溶液注入玻璃注射器中。
2.2將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調節壓力使溶液以約1滴/s的流速緩慢通過(guò)免疫親和柱,直至空氣進(jìn)入親和柱中。
2.3用10mL水淋洗親和柱流速為1滴/s~2滴/s.直至空氣進(jìn)入親和柱中,棄去全部流出液,抽干小柱。
2.4準確加入3mL甲醇-乙酸溶液( 98+2 洗脫流速約為1滴/s,收集洗脫液。50°C下氮氣濃縮吹干后,用乙腈水 (5+5) 定容至1 mL,待檢測。
二、液相條件及衍生方法
柱前衍生法
色譜柱: Cloversil-C18 4.6*150mm (5um) 或4.6*250mm (5um)
流動(dòng)相: 甲醇:0.1MNaH2PO4(77: 23 體積比)用磷酸將PH值調到3.3
檢測器: 激發(fā)波長(cháng)335nm 發(fā)射波長(cháng)440nm
進(jìn)樣體積: 20uL
衍生方法:取100uL標準溶液或樣品凈化液于進(jìn)樣瓶中加入100uL OPA衍生試劑A渦旋混合30s,在 2分鐘內進(jìn)樣分析。
柱后衍生法
色譜柱: Cloversil-C18 4.6*150mm (5um) 或4.6*250mm (5um)
流動(dòng)相: 甲醇/(65+35)
檢測器:激發(fā)波長(cháng)335nm發(fā)射波長(cháng)440mm
進(jìn)樣體積: 20uL
衍生泵流速: 0.4mL/min
衍生溫度: 50℃
衍生泵流動(dòng)相: OPA行生試劑B
HP-L10柱后衍生系統
HP-L20柱后衍生系統
? 實(shí)驗結果?
1、柱效回收:
2、樣品添加回收:取玉米樣品,伏馬B1B2B3混標添加各1000ppb。
3、標準品及樣品圖譜
圖1 柱前衍生標準品液相色譜圖(出峰順序B1,B3,B2)
圖2 柱后衍生標準品液相色譜圖(出峰順序B1,B3,B2)
C/N編號 | 物品 |
HP-L10 HP-L20 | CLOVER柱后衍生裝置 |
C1015 | 鄰苯二甲醛 (HPLC 法用) |
C1016 | 2-疏基乙醇(HPLC 法用) |
ZJ0612 | 科樂(lè )福 CLOVER 多位位泵流操作架(配有1臺空氣泵,6個(gè)10mL 針簡(jiǎn)) |
20202 | 高速勻質(zhì)器,轉速可達 18.000 r/in~22.000 r/min |
31955-C | 科樂(lè )福 CLOVER微纖維濾紙 (1.5um,100 張/盒) |
31240-C | 折疊式槽紋濾紙 (100 張/盒),或中速定性濾紙 |
36010-C | 一次性塑料燒杯(25/包) |
34000-C | 一次性無(wú)熒光測試管(250 支/包) |
36020-C | 塑料漏斗(10 個(gè)/包) |
CLOVER-1ST7224/5/6 | 伏馬毒素標準品 B1/B2/B3 |
35016 | 色譜純級的甲醇(4升/瓶) |
C546150-U | 科樂(lè )福 Cloversil C18 反相色譜柱 4.6*150mm (5um) |
C546250-U | 科樂(lè )福 Cloversil C18 反相色譜柱 4.6*250mm (5um) |
FCMF3-CCP320C | 玉米、飼料等基質(zhì)含有不同水平伏馬毒素的質(zhì)控樣品(FAPAS/Trilogy) |
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